液相色譜具有強(qiáng)大的分離、定量能力，是制藥行業(yè)為重要的分析檢測(cè)手段之一。然而，2010年版《中國(guó)藥典》之前的藥物分析方法基本都是HPLC方法，存在時(shí)間長(zhǎng)、效率低的缺點(diǎn)。通常分析一個(gè)化藥品種至少需要半個(gè)小時(shí)，而中藥的分離時(shí)間往往超過(guò)一個(gè)小時(shí)。

UHPLC 技術(shù)的發(fā)展給藥物的快速分析帶來(lái)了無(wú)限可能

UHPLC 是以亞二微米小顆粒、超高柱效的填料為核心的技術(shù)。根據(jù)范德米特曲線(xiàn)，更小的填料顆粒具有更高的柱效、更快的*佳線(xiàn)速度以及更寬的*佳流速范圍。因此，使用小顆粒的色譜柱，可以得到更高質(zhì)量的數(shù)據(jù)結(jié)果，并且可以通過(guò)提高流速來(lái)加快分析速度，而不會(huì)造成柱效的降低。另外，UHPLC 節(jié)省化學(xué)試劑的同時(shí)還減少了廢液處理量，大大降低了實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)營(yíng)成本。

圖 1. 超液相的理論基礎(chǔ)

安捷倫一直走在 UHPLC 發(fā)展的前列

早在 2003 年，安捷倫就在推出了亞二微米全多孔超色譜柱，隨后也推出了 Poroshell 120 表面多孔層填料。隨著色譜分離朝著速度更快、分離效果更好的方向發(fā)展，HPLC 系統(tǒng)已經(jīng)無(wú)法滿(mǎn)足*新色譜柱的應(yīng)用，取而代之的是各款不同耐壓、不同設(shè)計(jì)的 UHPLC 系統(tǒng)。

安捷倫的 UHPLC 系統(tǒng)已經(jīng)推出了第二代產(chǎn)品——全新 Infinitylab 液相家族。其中，Agilent 1220 Infinity II 和 Agilent 1260 Infinity II 兩款耐壓 600bar 的系統(tǒng)，延續(xù)了經(jīng)典款 1100 色譜系統(tǒng)的設(shè)計(jì)思路，既可以*適用超色譜柱，也可兼顧常規(guī) HPLC 方法。

耐壓 800bar 的 Agilent 1260 Prime LC 和耐壓 1300bar 的 Agilent 1290 Infinity II 液相系統(tǒng)，各個(gè)模塊都經(jīng)過(guò)全新設(shè)計(jì)，其中色譜泵搭載了保時(shí)捷卡宴同款機(jī)械傳動(dòng)機(jī)構(gòu)，更加可靠。

Agilent 1260 Infiniy II 液相色譜系統(tǒng)（左）與 Agilent 1220 Infinity II 液相色譜系統(tǒng) （右)

Agilent 1290 Infiniy II 液相色譜系統(tǒng)（左）與 Agilent 1260 Infinity II Prime LC 液相色譜系統(tǒng) （右）

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圖 2. UHPLC 提高指紋圖譜分析效率和質(zhì)量

安捷倫助力制藥行業(yè)從 HPLC 到 UHPLC 的華麗轉(zhuǎn)身

UHPLC 技術(shù)無(wú)疑將為藥物分析提供更好的解決方案。然而，要將 UHPLC 技術(shù)納入到藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，需要一個(gè)深度驗(yàn)證的過(guò)程。為了使 UHPLC 技術(shù)能更快更廣泛地應(yīng)用于藥物質(zhì)量控制的實(shí)踐中，安捷倫積極參與藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究、制定以及檢驗(yàn)檢測(cè)等項(xiàng)目，努力推動(dòng) UHPLC 技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用。

一起沿著安捷倫對(duì)不同版本的藥典所開(kāi)發(fā)的圖譜集之路，共同見(jiàn)證一下安捷倫在助力藥物檢測(cè) UHPLC 新方法標(biāo)準(zhǔn)上的成果吧。

2010 版   2010 年版《中國(guó)藥典》化學(xué)藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分析方法及應(yīng)用圖譜這本書(shū)中約占 52% 的品種不僅使用了傳統(tǒng)的 5 um 填料進(jìn)行分析，同時(shí)還使用了安捷倫 Poroshell 120 表面多孔層填料，在常規(guī)液相上建立了快速的方法。

2012 版   2012 版《藥品檢測(cè)新技術(shù)：從 HPLC 到 UHPLC 》一書(shū)是安捷倫與中國(guó)食品藥品檢定研究院合作，將藥典中部分中藥和西藥組分的 HPLC 方法轉(zhuǎn)換成 UHPLC 的方法，獲得了理想的分離結(jié)果，展示了 UHPLC 技術(shù)在藥品分析中的優(yōu)勢(shì)。

2014 版 安捷倫與中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所、清華大學(xué)、上海市食品藥品檢驗(yàn)所、浙江省食品藥品檢驗(yàn)研究院等單位合作，選擇了一批 2010 年版《中國(guó)藥典》（一部）中具有 HPLC 含量測(cè)定項(xiàng)的常用中藥進(jìn)行研究，力求為 UHPLC 方法快速應(yīng)用于中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)做出有益的探索。 書(shū)中采用安捷倫開(kāi)發(fā)的方法轉(zhuǎn)換軟件對(duì) 145 種中藥材及 41 種中成藥進(jìn)行了從 HPLC 到 UHPLC 的方法轉(zhuǎn)換，并且進(jìn)行了結(jié)果對(duì)比。如圖所示，桂枝茯苓膠囊指紋圖譜的研究中，UHPLC 時(shí)間縮短到 HPLC 時(shí)間的 1/5，分離度也得到了明顯的改善。

基于這些大量的數(shù)據(jù)支撐，2015 年版《中國(guó)藥典》第四部中，對(duì)藥物分析的 UHPLC 方法涉及到的儀器、色譜柱以及色譜條件做出了相應(yīng)的說(shuō)明：

“若需使用小顆粒（ 2um ）填充劑，輸液泵的性能、進(jìn)樣體積、檢測(cè)池體積和系統(tǒng)死體積等必須與之匹配；如有必要，色譜條件也應(yīng)作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。”。

相信即將推出的 2020 年版《中國(guó)藥典》必將進(jìn)一步細(xì)化 UHPLC 在藥物分析中的方案。

“*流企業(yè)做標(biāo)準(zhǔn)，二流企業(yè)做品牌，三流企業(yè)做產(chǎn)品”。安捷倫助力藥物檢測(cè) UHPLC 新方法的制定，必將促使制藥行業(yè)華麗轉(zhuǎn)身，迸發(fā)出新的發(fā)展活力。
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